细胞名称：HEP-53.4 小鼠肝癌细胞

细胞别名 ：HEP-53.4 ; 53.4 ; 小鼠肝癌细胞

细胞来源 ：德国

细胞鉴定： STR鉴定已通过

细胞形态 ：上皮样细胞，贴壁生长

培 养 基 ：DMEM(含NaHCO3 1.5g/L)(BasMed-AW-013)+FBS 10% + P/S1%

培养条件 ：气相空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%

冻存条件： 无血清冻存液，液氮储存

细胞背景：来源于 C57BL/6J小鼠的原发性肝细胞癌，这些小鼠肝细胞忠实地代表了肝细胞癌，并为研究这种类型的肝癌提供了有价值的模型，同义词HEP-53.4和53.4，它们便于识别和交叉引用，肝细胞癌是一个重大的健康问题，这些细胞能够对其分子通路、细胞相互作用和治疗策略进行精确研究，这些细胞起源于Mus musculus(小鼠)，为理解和开发肝细胞癌的治疗方法提供了相关的模型系统。

细胞用途 ：仅供科研使用

细胞货期：现货，1周左右

细胞事项

常温发货

收到后T25瓶消毒再放置培养箱静置2-3小时后观察密度和状态拍照2-3张反馈给销售，密度达标就可以传代。前期传代比例1:2，等再次长满后传代时建议冻存其中一整瓶成1个1ml冻存管，另外一瓶继续传代，反复冻存2-3只后才扩增做实验，以防突发情况引起断种。

干冰发货

常规细胞发货冻存管2只，复苏1只，另外一只备用，第一个复苏不成功时严格按照厂家要求复苏第二个，均没有复苏成功的情况即时留存复苏照片通知我们。

注意事项

1. 常规消化收集细胞离心。

2. 离心后去掉离心管内上清，加入1ml重悬细胞混匀，建议轻轻晃动或者轻轻吹打细胞， 放入培养箱消化细胞，再消化1min左右。

3. 消化好后，用移液枪轻轻吹打细胞悬液，使细胞团分散，迅速加入3-5ml含血清的培养基混匀以终止消化，。

5. 显微镜下观察看细胞是否成均匀分散的单细胞，若有少量成团的小细胞团可不用重新消化，使之贴壁后待细胞生长稳定后再消散细胞。

4. 加入5ml左右的细胞相应的培养基混匀，按比例接入培养瓶/皿中。

贴壁细胞

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2. 加入0.25％(w / v） EDTA于培养瓶中(T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培养箱中消化1-2分钟(难消化的细胞可以适当延长消化时间），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。

特别注意

该细胞在 DMEM(含 1.5g/LNaHCO3)培养基中生长良好，大部分的 DMEM 含有较 高浓度的 NaHCO3（3.7g/L），若使用 DMEM（3.7g/L NaHCO3）培养基培养细 胞时需要提高 CO2 浓度（7%-10%）