当前位置：首页 > 新闻资讯 > 酶联免疫吸附试验诊断猪瘟
间接法ELISA Saunder等报道并肯定了应用快速酶标记抗体微量技术检查猪瘟抗体的诊断方法。先用PK-15细胞增殖猪瘟病毒作为抗原，包被微量滴定板，随后加入被检血清（*抗体），冲洗后再加入酶标记的兔抗猪Y球蛋白，再经冲洗，zui后加入底物显色。Saunder通过60份血清检测结果，证明酶标记抗体法和血清中和试验的符合率在99％以上。但中和试验需要18h才能获得结果，酶标记抗体仅需1～2h。必须指出，Saunder等所得到的结果是用酶标记抗体间接法检测猪瘟抗体。由于我国普遍开展兔化弱毒疫苗的预防注射，猪血清中几乎都有猪瘟抗体，这样就给酶标抗体诊断法带来困难。区分猪瘟疫苗抗体的ELISA（单克隆抗体ELISA） 丘惠深等分别应用淋巴细胞杂交瘤技术，研制出可以鉴别猪瘟兔化弱毒、猪瘟病毒、牛病毒性腹泻病毒及边界病病毒的特异性猪瘟兔化弱毒单抗及猪瘟石门株单抗。用亲和层析法制成单抗酶联试剂后，可将疫苗注射血清、猪毒感染血清、混合血清和猪瘟阴性血清区别开来。房德兴等建立了单克隆抗体ELISA抑制法，用于检测细胞培养物中的猪瘟兔化弱毒，可望取代兔体接种试验，检测疫苗效价。夹心ELISA 夹心ELISA是检测病毒抗原的常用方法，国内外许多学者均已发展或报道了夹心ELISA方法的研究应用。Kosmidou等（1995）使用单克隆抗体技术建立了一种猪瘟病毒抗原的ELISA检测方法。汤赛冬等建立了检测猪瘟病毒抗原的夹心ELISA方法，该方法是先以zui适量纯化猪瘟病毒抗体包被酶标板，加入待测抗原，再加入酶标抗体，zui后加入底物及终止液。猪瘟RT-PCR ELISA诊断方法 反转录聚合酶链式反应（RT-PCR）已广泛应用于痘病毒和猪瘟病毒的诊断。在国外，有些学者结合RT-PCR技术，又建立了用特异性荧光探针和生物素标记的捕获探针检测CSFV的新方法。在我国，孙世琪等建立了猪瘟RT-PCRELISA诊断方法。从CSFV 5，-UTR设计特异性引物和捕获探针，用地高辛标记RT-PCR产物，再以RT-PCREIASA方法，用生物素标记的探针在链亲和素包被的微量板孔中杂交捕获RT-PCR产物，并进行免疫显色；通过对CSFV标准菌株和分离菌株进行检测，建立一种特异性强、敏感性高、快速、简便且实用的非放射性检测CSFV的方法，为CSFV的分子流行病学调查和早期诊断提供了一条新的途径。
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更新时间：2011-11-02 
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