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兔elisa试剂盒操作步骤及特点
时间:2021-08-10      阅读:1043
   兔elisa试剂盒在做试验前首先让我们先来了解一下它的操作步骤,使用前,得将试剂充分混匀,然后再根据待测的样品数量决定板条数。具体步骤跟着小编往下看吧:
  
  一、操作步骤
  1、使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。
  2、根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后加入50ul于反应孔内。
  3、加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。
  4、甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
  5、每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。
  6、甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
  7、每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。
  8、取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。
  9、在450nm波长处测定各孔的OD值。
  
  二、兔elisa试剂盒的性能特点:
  1、 准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0、9900。
  2、 灵敏度:zui低检测浓度小于(参考说明书)
  3、 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
  4、 重复性:板内、板间变异系数均小于15%。
  5、 贮藏:2-8℃,避光防潮保存。
  6、 有效期:6个月。
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