我们知道,可以用作ELISA测定的标本很广泛,包括了体液、分泌物和排泄物等,均可作标本以测定其间某种抗体或抗原成份。这些标本搜集的时间、方法和保存都有必定的要求。今天上海通蔚生物为您
说明:ELISA操作严格要求定当做出好实验。
按试剂盒说明书的要求准备实验中需用的试剂。ELISA顶用的蒸馏水或去离子水,包括用于洗刷的,应为新鲜的和高质量的。ELISA试剂盒自配的缓冲液使用pH计测量较正。从冰箱中取出的实验用试剂应待温度与室温平衡后运用。试剂盒中本次实验不需用的部分应及时放回冰箱保存。
试剂盒的制造:对于每种细胞因子应仔细阅读说明书,留心每批的细节。在运用细胞因子前,瞬时离心试剂瓶,尽可能多地回收其间的细胞因子。依据每批说明书中的细节,将冻干的细胞因子复溶。一般待测抗原标准曲线的线性规模的可通过将标准品做8次2倍系列稀释从2000pg/ml到15pg/ml。可利用标准的ELISA操作流程、扩展试剂盒、第三类试剂、或改动酶底物体系可在必定规模内提高灵敏度。为了优化灵敏度,主张孵育标准品和标本。ELISA试剂盒若运用过氧化物酶作为显色体系,应制止在洗液和稀释液中加叠氮钠,叠氮钠可抑制过氧化物ELISA试剂盒酶的活性。
试剂盒的操作因固相载体的构成不同而有所差异,国内医学检验一般均用板式点。
洗板方法:
① 手工洗板,吸去(不行触及板壁)或甩掉酶标板内的液体;在实验台上衬托几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几回;将推荐的洗刷缓冲液至少0.3ml注入孔内,浸泡1-2分钟,依据需要,重复此进程数次。
② 自动洗板,如果有自动洗板机,应在娴熟运用后再用到正式实验进程中。