为帮忙我们了解ELISA试剂盒所需求样本处理及要求,ELISA试剂盒样本前处理是酶联免疫试验中要害的一步,稍有不小心将导致试验满盘皆输,怎么安全,方便的处理样本。
我司何做出了以下的分析:
1. 安排标本:切开标本后,称取重量。参与一定量的PBS,PH7.4。用液氮敏捷冷冻保存备用。标本融化后依然坚持2-8℃的温度。参与一定量的PBS(PH7.4),用手艺或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。细心收集上清。分装后一份待检测,其他冷冻备用。
2. 血清:室温血液天然凝聚10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。细心收集上清,保存过程中如出现堆积,应再次离心。操作过程中防止任何细胞影响。运用不含热原和内毒素的试管。
3. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右 (2000-3000转/分)去除颗粒。细心收集上清,保存过程中如有堆积构成,应该再次离心。
4. 标本收集后尽早进行提取:提取按相关文献进行,提取后应尽快进行试验。若不能立刻进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应防止重复冻融.
5. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。细心收集上清,保存过程中如有堆积构成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
6. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。细心收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度到达100万/ml左右。经过重复冻融,以使细胞损坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。细心收集上清 。保存过程中如有堆积构成,应再次离心。
7. 不能检测含NaN3的样品:因NaN3克制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
ELISA技术的操作要害
杰出的仪器和正确的操作是保证ELISA检测作用牢靠的必要条件。ELISA的操作因固相载体的构成不同而有所差异,国内医学查验一般均用板式点.本文将叙说板式留意要害,要具体的运用说明,严峻遵循规矩操作,必能得出的作用.