主要试剂:
愈创木酚(分析纯),丁二酸, NaOH标准溶液。
底物的配制:137.4μl愈创木酚(分析纯)与4.5g丁二酸混合, 用NaOH溶液调PH至4.5,用蒸馏水定容至1L 。
主要仪器:
⑴UV - 2100 型紫外 - 可见分光光度计;
⑵DELTA 320型 pH计。
试验方法:
1 将酶液以需要的倍数进行稀释。
取2.4ml底物,加0.6ml酶液,混匀,30度反应30min。
2 在465纳米下测其吸光值。
计算公式:
酶活(U/L)= A×n×13.89
A吸光度值 n稀释倍数 13.89系数
定义:
一分钟内氧化1μmol 愈创木酚所需的酶量为1个酶活单位(U)。