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ELISA试剂盒试验的标准曲线和测定的重复性差的原因
更新时间:2017-10-13      阅读:4559

ELISA试剂盒实验中,有很多新手在检测时候遇到试验的标准曲线和测定的重复性差,这是什么原因造成的?上海通蔚生物就以上问题作出具体解答,欢迎参考学习。
 

ELISA试剂盒实验中常见原因如下:
a)可能原因:加样本及试剂量不准;孔间不一致;
解决方法:校正移液器,吸嘴要配套,装吸嘴时要紧密。
重复某一样品时,加样时间尽可能与*次接近;
重复测定标本,操作条件、人员等应尽可能与上次保持一致,以排除这些因素造成的不一致的可能性;样品稀释前应充分混匀。
b)可能原因:加样过快,孔间发生污染;
解决方法:重复测定标本,操作条件、人员等应尽可能与上次保持一致,以排除这些因素造成的不一致的可能性;加样不要过快。         
c)可能原因:加错样本;
解决方法:检查记录和试剂,是否加错样本。
d)可能原因:加样本及试剂时,加在孔壁上部非包被区;
解决方法:加样枪头不要贴壁。
e)可能原因:不同批号试剂盒中组分混用;
解决方法:不同批号试剂盒中组分不可混用。
f)可能原因:温育时间、洗板、显色时间不一致;
解决方法:检查时间是否一致。
g)可能原因:孔内污染杂物;
解决方法:离心样品,排除杂物。
h)可能原因:试剂/样品没有混匀;
解决方法:充分混匀样品和试剂。
i)可能原因:血清标本未*凝固即加入,反应孔内出现纤维蛋白凝固或残留血    
细胞,易出现假阳性反应等。
解决方法:待血清标本*凝固后做试验。
 

ELISA试剂盒实验室,对试剂准备一般不太注意,通常的做法是,在实验时将试剂从冰箱中拿出来即用,而忽略了这种做法有可能影响后面温育时间不够的问题,其直接的后果是对一些弱阳性标本的检测出现假阴性。上海通蔚生物代理的ELISA试剂盒预期应用:ELISA法定量测定血清、血浆、组织匀浆或其它相关生物液体中目标蛋白含量。

 

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