可以借用专业制作曲线软件进行分析,如curve expert 1.3,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,ELISA试剂盒严格按照实验步骤进行ELISA实验,得出试验数据,就需要处理计算数据,做出拟合曲线,计算浓度了。根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度,再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的回归方程式,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
这里就介绍一下运用EXCEL进行计算的方法,你只要双击图表,把它输入到图表的数据中,就可以拟和曲线。根据曲线方程式,计算出浓度。
ELISA试剂盒方法:
1、拟和曲线:
输入*行: 浓度值, 如0 10 50 100 400
输入第二行:该浓度下的调整后的od值,如0 0.586 1.397 1.997 3.42
选择这些输入的数据,用插入里的图表按钮,进入图表向导,在“标准类型”中选择“xy散点图”;在“子图表类型”中选择“折线散点图”,按“下一步”;选择“系列产生在行”,按“下一步”;数据标志,可以填写:如数据y轴,OD值;数据x轴,浓度;按下一步,点击完成。可得曲线图。
单击曲线,按右键,选择“添加趋势线”,在类型中,选择多项式;在选项中,选择显示公式,选择显示R平方值。
得到公式和R平方值。
ELISA试剂盒也可以用上面说的方法: 双击图表,把它输入到图表的数据中,就可以拟和曲线。
2、计算浓度:
*次实验:
标准曲线为:
y = -4E-05x2 + 0.026x
R2 = 0.9745
为例,已知OD值,计算浓度。
由于y = -4E-05x2 + 0.026x,可以得到:
4E-05x2 -0.026x +y=0
ax2 +bx +y=0