本试剂仅供研究使用  标本：血清或血浆

试验原理：

IMA试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知IMA浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。ELISA检测试剂盒先将IMA和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中IMA的浓度呈比例关系。

洗涤缓冲液（50×）的稀释：蒸馏水50倍稀释。

操作步骤

使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。
根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。
加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。
甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，ELISA检测试剂盒甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。
甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。
取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。
在450nm波长处测定各孔的OD值。

局限

6号标准品以上的结果为非线性的，根据此标准曲线无法得到的结果。

试剂盒性能

1. 灵敏度：zui小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。

2. 特异性：不与人其它细胞因子反应。

3. 重复性：板内、板间变异系数均小于10%。

结 果 判 断 与 分 析

1、仪器值：于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值

2、以吸光度OD值为纵坐标（Y），相应的IMA标准品浓度为横坐标（X），做得相应的曲线，样品的IMA含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。

3、ELISA检测试剂盒检测值范围：0-80ng/ml

4、敏感度： 0.1 ng/ml

DMEM细胞培养基A高糖、谷氨酰胺、丙酮酸钠B高糖、谷氨酰胺C高糖、丙酮酸钠D低糖、谷氨酰胺、丙酮酸钠E无酚红 Y74389 500毫升
RPMI 1640细胞培养基A谷氨酰胺、高糖B丙酮酸钠、HEPES、高糖C高糖、谷氨酰胺、HEPESD谷氨酰胺、丙酮酸钠、HEPES Y74390 500毫升
胰蛋白酶（0.05%）乙二胺四乙酸混合液 Y74391 100毫升
胰蛋白酶（0.25%）乙二胺四乙酸混合液 Y74392 100毫升
乙二胺四乙酸（EDTA）细胞脱离溶液 Y74393 100毫升
Hanks平衡盐缓冲溶液（HBSS） Y74394 500毫升
Hanks钙镁平衡盐缓冲溶液（HBSS） Y74395 500毫升
Hanks钙镁平衡盐缓冲溶液（HBSS）不含NaHCO3 Y74396 500毫升
10倍Hanks平衡盐缓冲溶液（HBSS） Y74397 500毫升
标准磷酸平衡盐（PBS）缓冲溶液 Y74398 500毫升
钙镁磷酸平衡盐（PBS）缓冲溶液 Y74399 500毫升
10倍磷酸平衡盐（PBS）缓冲溶液（0.1 M） Y74400 500毫升
*氨基酸补充溶液（1X） Y74401 100毫升
*氨基酸补充溶液（10X） Y74402 100毫升
青链霉素混合液 Y74403 100毫升
新生牛血清 Y74404 500毫升
无激素精制胎牛血清 Y74405 100毫升
胰蛋白酶中和液 Y74406 100毫升
细胞培养细菌污染定性荧光检测试剂盒 Y74407 20次
细胞培养病毒污染溶斑法结晶紫染色试剂盒 Y74408 20次
细胞培养病毒污染溶斑法中性红染色试剂盒 Y74409 20次
通用型细胞培养污染性支原体属鉴定16S rDNA PCR扩增检测试剂盒 Y74410 20 /50次