乙肝表面抗原（HBsAg）血清检测是献血者和肝炎病人乙肝病毒感染的重要依据 ， 由于ELISA法监测简单、快速、成本低且具有较好的特异性和较高的灵敏度，特别适合大批献血员的筛查，已经成为血站和临床的主要检验方法。
由于不同生产厂家生产ELISA试剂盒的方法不同，导致灵敏度也不相同。为了深入了解血液HBsAg ELISA筛查阳性样本确证结果，分别采用进口和国产ELISA试剂盒进行血液筛查，中和实验及分子生物学PCR方法对阳性结果进行确证分析，对15400例无偿献血者进行国产和进口试剂筛查，155例阳性结果进行多方法确证分析，现将结果报告如下。

1 材料与方法
1.1 对象
收集深圳市无偿献血者样本共15400例。所有样本均经乙肝金标试纸条筛查合格。
1.2 检查项目及标准
血液筛查按卫生部《献血者健康检查标准》。HBsAg中和实验中和率>50%为确证阳性。
1.3 方法
HBsAg筛查两遍均采用ELISA法，确证实验为中和实验，对ELISA阳性而中和实验阴性样本应用PCR法复证。
1.4 试剂
HBsAg初筛为国产试剂，复查为进口试剂，HBˉsAg中和试剂为美国诺泰公司产品。定性PCR采用美国诺泰公司和上海伊丽萨生物科技。
1.5 仪器
瑞士TECAN RSP-200及瑞士MICRO STAR全自动加样仪，Microlab FAME和德国DADE Behring全自动酶免分析仪。德国ROCHE COBAS PCR分析仪和PE5700核酸扩增仪。

2 结果
2.1 以卫生部临床检验中心的1ng/ml HBsAg质控血清，用正常血清稀释随标本检测，国产ELISA试剂盒检测灵敏度为0.5ng/ml，进口ELISA试剂盒为0.10ng/ml。用中和实验对稀释0.1ng/ml HBsAg质控血清进行10批次检测，均成阳性结果。
2.2 对15400人份血样用国产和进口ELISA试剂盒检出HBˉsAg阳性样本155份（占总数0.99%），经中和实验确证阳性122例，HBsAg真阳性检出率为0.79%，对单进口或国产试剂阳性而中和实验确证阴性的标本用PCR定性实验检测DNA复证， 33例（占总数0.21%）中和实验和PCR结果均为阴性，提示ELISA结果可能为假阳性。

2.3 确证实验阳性的122份样本S/CO值
其中进口试剂S/CO值分布以>3为大多数，占91.7%，表 明进口ELISA试剂盒灵敏度高，不易漏检。国产ELISA试剂盒S/CO值分布以1～10之间为多数占65.5%，而1～0.7区间有11例，占9%，表明试剂灵敏度欠佳。

3 讨论
由于两种试剂灵敏度不同，其结果差异较大。在155例ELISA阳性样本中，共122例确证阳性，其中国产试剂检出88例，检出率为72.1%，进口试剂全部检出，两者差异有显著性（X 2 =17.1，P<0.05）。在进口试剂单阳性结果40例中，经确认34例为阳性，国产试剂未检出，国产试剂存在一定的漏检率。主要由于0.5～0.1ng/ml的HBV不能检出的原因。在33例ELISA阳性确证实验阴性样本中，进口试剂占6例，为18.2%，国产试剂27例，占71.8%，进口试剂假阳性率明显比国产试剂低。为减少输血后乙肝感染，在复检时采用高灵敏度特异性较好的进口ELISA试剂盒是很有必要的。
由于中和实验具有特异性高，可操作性强，在对乙肝病毒DNA检测条件要求很高的情况下，运用中和实验进行ELISA阳性结果的确定分析，具有很高的实用价值。