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上海研域生物大鼠ELISA试剂盒的操作步骤与方法
更新时间:2025-11-11      阅读:48

随着科研大鼠ELISA试剂盒产品ELISA试剂盒供应商的增多,困扰客户的问题也随之出现,比如原装ELISA试剂盒与分装ELISA试剂盒的区别,产品的代测情况,本公司拥有一对一全程指导服务,为客户排忧解难,


大鼠ELISA试剂盒


试剂盒的操作方法:

本方法首先将特异性抗体吸附于固相载体表面,我们把抗原和抗体吸附到固相载体表面的这个过程,称为包被,也可叫做致敏。经洗涤后分成两组:一组加酶标记抗原和被测抗原的混合液,而另一组只加酶标记抗原,再经孵育洗涤后加底物显色,这两组底物降解量之差,即为我们所要测定的未知抗原的量。

1.包被抗体:用包被缓冲液稀释特异性抗体球蛋白至*适浓度(1~10μg/ml),每凹孔加0.3ml,4℃过夜,或37℃水浴3小时,贮存冰箱。

2.洗涤:移去包被液,凹孔用洗涤缓冲液(含0.05%吐温-20)洗3次,每次5分钟。

3.分2组,a组加酶标记抗原和被检抗原Elisa试剂盒混合液0.2ml,b组只加酶标记抗原液0.2ml,37℃作用1~2小时。(混合液可作成不同稀释度)

4.洗涤:移去包被液,凹孔用洗涤缓冲液(含0.05%吐温-20)洗3次,每次5分钟。

5.加入0.2 ml底物溶液于每个凹孔(OPD或OT),室温作用30分钟(另作一空白对照,0.4ml底物加0.1ml终止剂)。

6.加终止剂:每凹孔加2M H2SO4或2M柠檬酸0.05ml。

7.用酶标比色计测定a、b两组OD值,并求出a、b、OD值的差数。

试剂盒的注意事项:

1.干冰是固体二氧化碳,温度为零下78℃,湿冰就是冰的温度,一般为冷冻条件的温度,如在零下20℃冷冻的冰的温度为零下20℃。对于一些酶类等蛋白产品,需要干冰运输,其他大多数生化试剂采用湿冰即可;

2.运输常温试剂的时候,不需要冰。对于需要冷藏的试剂,在用冰运输的时候,要把试剂同冰之间有隔离物,不能直接接触试剂包装,如试剂外面加装盒子,在盒子外面加冰,基本都采用冰块,不能直接用水结成的冰,因为冰融化后会形成水,容易污染试剂。加冰块的量没有严格限制,以试剂Elisa试剂盒四周都处于冰块包围为宜;

3.不要小看生物试剂的量,很多抗体类试剂、酶类试剂是很贵的,可以达到上千元/mg(即每公斤几百,上千万元),其保存条件也是很严格的,否则容易失去活性。运输的时候建议使用冰块,而非碎冰,

主要原因:(1)碎冰的温度高,而冰块的温度更低;(2)冰块可以更长时间的保持低温;(3)碎冰容易化成水。

上海研域生物大鼠ELISA试剂盒操作步骤简单、产品灵敏性和重复性较好,性价比较高如有所需请联xi我们,我司期待与您的合作,客户所提供的试剂及试剂盒根据试剂本身保存要求运输。

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