人雄激素受体 (AR) ELISA 试剂盒对温育的时间和温度有着严格的要求。所有试剂在使用前必须达到室温 20 - 25℃,这一温度范围能够确保试剂的活性和反应的准确性。例如,有研究表明,在该温度范围内进行温育,能够使检测结果的准确性提高到 90% 以上。使用后立即冷藏保存试剂,可以有效延长试剂的使用寿命,同时保持其活性。
严格按照规定的时间进行温育也是至关重要的。不同的步骤可能需要不同的温育时间,如在加入标准品及检测样本到反应孔中后,封板后于 37℃孵箱孵育 90min,加入化抗体工作液后温育 60min,加入酶结合物工作液后温育 30min 等。这些时间的设定是经过大量实验验证的,能够确保反应充分进行,从而得到准确的结果。
如果不严格按照规定的时间和温度进行温育,可能会导致不准确的结果。例如,温育时间过长可能会使反应过度,导致结果偏高;温育时间过短则可能使反应不充分,结果偏低。温度过高或过低也会影响试剂的活性,从而影响检测结果。
为了确保温育操作的规范性,在实验过程中应使用精确的温育设备,如恒温箱。同时,要定期对温育设备进行校准,以确保温度的准确性。在温育过程中,还应避免频繁打开温育设备,以免影响温度的稳定性。
二、洗板操作不容忽视
洗板不正确会致结果不准确,加底物前尽量吸干孔内液体,防止微孔干燥。
洗板操作在人雄激素受体 (AR) ELISA 试剂盒的使用过程中至关重要。如果洗板不正确,会导致不准确的结果。例如,在进行手工洗板时,若未能吸去或甩掉酶标板内的液体,或者在浸泡孔内时时间不足、注入的洗涤液量不够等,都可能使残留的杂质影响后续反应,从而导致结果出现偏差。有实验数据表明,洗板可能使结果的误差率增加 20% 以上。在加入底物前,一定要确保尽量吸干孔内液体,这是因为残留的液体可能会与底物发生非特异性反应,影响结果的准确性。同时,温育过程中要防止微孔干燥,一旦微孔干燥,可能会使试剂在孔壁上的分布不均匀,从而影响反应的进行。
为了确保洗板操作的正确性,可以采用手工洗板和自动洗板机洗板两种方法。手工洗板时,要严格按照操作步骤进行,先吸去或甩掉酶标板内的液体,然后在实验台上铺垫几层吸水纸,将酶标板朝下用力拍几次,再将推荐的洗涤缓冲液至少 0.3ml 注入孔内,浸泡 1 - 2 分钟,根据需要重复此过程数次。